细胞传代是一种关键的实验室操作，旨在将生长到一定密度的细胞从原培养容器中分离，重新接种到新容器中继续培养。简单地说，这就如同为细胞更换一个“新家”，以促进它们的生长和繁殖。就像我们居住的空间过于拥挤时，需要寻找一个更宽敞的房子。

细胞传代的观察步骤

1️⃣ 每天使用倒置显微镜观察细胞。当细胞的融合度达到80%-90%时，即可开始传代。如果细胞融合度过高，它们会因为空间不足而影响生长。

传代准备工作

在开始传代之前，需进行以下准备：

2️⃣ 准备工作包括消毒培养器具，确保无污染。

3️⃣ 消化细胞：通过消化液处理细胞以分离其与培养基的结合。

4️⃣ 终止消化：在消化完成后，及时加入终止液以停止细胞消化。

5️⃣ 离心收集：使用离心机将细胞沉淀，去除培养基。

6️⃣ 重悬与分瓶：将细胞重悬于适合的培养基中，分装到新培养容器中。

7️⃣ 培养与观察：密切观察细胞在新环境中的生长状态。

悬浮细胞的传代

悬浮细胞的传代相对简单。当细胞密度达到80%-90%时，可以直接进行传代：

1️⃣ 收集细胞，按照上述步骤进行处理。

2️⃣ 重悬与分瓶。

3️⃣ 培养并观察细胞的生长情况。

细胞观察的要点

在观察细胞状态时，需注意以下几点：

1️⃣ 显微镜下观察细胞的形态变化。

2️⃣ 观察培养基的流动状态，以保障细胞的活力。

3️⃣ 检测吹打时的阻力变化，以判断细胞的聚集状态。

4️⃣ 离壁率计算：离壁率的公式为（悬浮细胞数/总细胞数）×100%。当离壁率达到75%-85%时，可表示细胞消化完成，需立即加入终止液。

5️⃣ 可采用温差预判法来辅助判断细胞状态。

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